Влияние периода замораживания на состав грудного молока

До настоящего времени исследования, направленные на изучение влияния длительного замораживания на питательные свойства грудного молока, практически не проводились. Между тем, замораживание грудного молока при температуре -20°C является одним из лучших способов сохранения его микробиологической безопасности. Представляем Вам данные исследования, целью которого было изучение влияния длительного (до 90 дней) замораживания грудного молока на его макронутриентный состав.

Предисловие “Молочной мамы”

На основании проведенных исследований было установлено, что наибольшие количественные изменения при замораживании претерпевают жиры (максимальное уменьшение наблюдалось в период от 0 до 7 дней - 0,027 гр/дл/день, далее – постоянное уменьшение). Так как калорийность молока зависит от содержания в нем жиров, соответственно, было выявлено и снижение калорийности грудного молока при замораживании  (наибольшее уменьшение наблюдалось в период с 0 по 7-й день -0,22 ккал/дл/день, впоследствии уменьшение было постоянным, но небольшим). В отношении общего азота и лактозы наблюдалась небольшая непостоянная и, в большинстве случаев, незначительная разница.

Для наглядности, сравним данные данного исследования с результатами другого исследования, демонстрирующего средние показатели жира, калорийности и других компонентов свежесцеженного грудного молока с аналогичными показателями в детской искусственной смеси (данные взяты здесь и здесь):

 

Минимальный показательпосле 90 дней заморозки

Среднее для грудного молока

Искусственная смесь

Жир (г/л)

41,9

43,2

(диапазон от 28 до 57)

34,4

Калорийность (ккал/л)

679,5

714

(диапазон от 540 до 842)

655

Таким образом, мы видим, что даже после 90 дней заморозки, в сцеженном молоке содержится больше жира и его калорийность выше, чем у детской смеси.

Жиры играют огромную роль в питании детей первого года жизни. Они обеспечивают потребность в энергии на 50%, являются компонентами биологических мембран, носителями жирорастворимых витаминов. Жиры являются источником жирных кислот (омега-3, омега-6): в частности, особое значение имеют полиненасыщенные жирные кислоты, которые участвуют в формировании головного мозга и зрительного анализатора, клеточной пролиферации, в регуляции аппетита, росте организма, Полиненасыщенные жирные кислоты являются предшественниками  широкого спектра биологически активных соединений – эйкозаноидов, принимающих участие в регуляции иммунного ответа, артериального давления, тонуса гладкой мускулатуры.  Особое внимание следует уделить  потреблению с пищей жиров детьми первого года жизни, находящимся на искусственном вскармливании, ведь грудное молоко характеризуется более высоким содержанием полиненасыщенных жирных кислот, по сравнению с его искусственными заменителями. С целью приближения жирового состава искусственных смесей, их дополнительно обогащают смесями растительным масел. Но ни одно растительное масло по своему жирнокислотному составу не соответствует полностью женскому грудному молоку.  

С нашей точки зрения, результаты проведенного исследования важны для понимания того, что длительное замораживание грудного молока не приводит к радикальному изменению его химического состава.

Снижение уровня жиров и калорийности может быть критично только в случае докорма донорским замороженным молоком глубоко недоношенных детей, так как их потребности в жирах и калориях намного выше, чем у здоровых доношенных детей. В данном случае лучше использовать грудное молоко недавней заморозки (до 7 дней).

В связи с упомянутыми выше отличиями жирового состава искусственных смесей и грудного молока, при невозможности естественного вскармливания и необходимости докорма – предпочтителен докорм сцеженным или донорским грудным молоком.

Краткое содержание

Введение

В отделениях для новорожденных и банках материнского молока замораживание грудного молока при температуре –20°C является единственным возможным вариантом для его сохранения.

Научные доказательства потери питательных свойств во время замораживания встречаются редко.

Главная цель нашего исследования – определить влияние замораживания грудного молока продолжительностью до 3-х месяцев на содержание в нем жира, общего азота, лактозы и на его энергетическую ценность.

Второстепенная цель исследования – с помощью анализатора грудного молока оценить, обеспечивает ли ультразвуковая гомогенизация образцов более точное прочтение состава грудного молока.

Методы исследования

Были собраны образцы охлажденного грудного молока. Каждый образец был разделен на 6 пар аликвот (в аналитической химии — точно измеренная кратная часть образца, взятая для анализа, которая сохраняет свойства основного образца – прим.ред.). Одна пара была исследована в тот же день, оставшиеся пары образцов были заморожены и исследованы по одному образцу на 7й, 15й, 30й, 60й и 90й день соответственно.

В каждой паре одна аликвота была гомогенизирована при помощи перемешивания, другая с применением ультразвука. Образцы были исследованы с помощью анализатора грудного молока.

Результаты исследования

К третьему месяцу после замораживания, используя два способа гомогенизации, мы наблюдали допустимое и достоверное с точки зрения статистики снижение концентрации жира и энергетической ценности.

Изменение количества общего азота и лактозы не было постоянным и не достигло низших показателей.

Абсолютная концентрация всех питательных веществ (макронутриентов) и калорий была выше в тех образцах, которые подверглись ультразвуковой гомогенизации.

Выводы

После 3-х месяцев со дня замораживания при температуре –20°C наблюдается сокращение доли жиров и калорий. А правильная гомогенизация является залогом точного анализа питательной ценности грудного молока.

Полное описание исследования

Введение

В отделениях для новорожденных и банках грудного молока замораживание грудного молока при температуре от –20°C гарантирует его микробиологическую сохранность и препятствует размножению микроорганизмов.

При этом ферментная активность, свойственная грудному молоку может сохраняться и при низких температурах. Научные доказательства потери питательных свойств во время замораживания встречаются редко.

Некоторые исследования признают замораживание при –80°C так называемым «золотым стандартом» длительной заморозки грудного молока, так как это позволяет минимизировать потерю его свойств.

Однако, это очень дорогостоящий способ, и большинство отделений для новорожденных и банков грудного молока используют метод замораживания только при температуре – 20°C.

В международных стандартах максимальный период продолжительности заморозки, рекомендуемый для материнского и донорского молока (до и после пастеризации), варьируется в пределах от 1 до 12 месяцев.

Влияние продолжительности замораживания при температуре –20°C на макронутриенты (жир, белки, лактоза) и энергетическую ценность едва изучено.

Наша главная цель в представленном исследовании – определить влияние периода замораживания до 3-х месяцев на содержание жира, общего азота, лактозы и энергетической ценности в образце сырого грудного молока, используя анализатор грудного молока..

Замораживание грудного молока приводит к череде физических изменений,  таких как разрыв оболочки жирового шарика и деформация мицеллы казеина, в его главных компонентах.

Как указано в других исследованиях, получение показательных образцов размороженного материнского молока играет важную роль в правильности его изучения.

В предыдущих исследованиях ультразвуковая гомогенизация использовалась, чтобы оптимизировать гомогенизацию и избежать потери жира в инфузионных системах.

Второстепенная цель нашего исследования – оценить, обеспечивает ли ультразвуковая гомогенизация образцов более точное прочтение состава грудного молока.

Материалы и методы

Двое исследователей принимали участие в сборе, подготовке и изучении образцов. Слепой метод проведения исследований не применялся ни на одной стадии исследования.

Образцы

Образцы грудного молока были собраны в объеме по 35 мл каждый, сцежены вручную или с помощью молокоотсоса. Сразу же после сцеживания образцы поместили в холодильник для хранения при температуре ниже 5°C на срок не более 24 часов до начала исследования.

У всех доноров дети находились в отделении неонатологии в госпитале «12 Октября» (Мадрид, Испания). Все женщины подписали информированное согласие.

Образцы поступили от одного или нескольких сцеживаний в течение 24 часов и были помещены в стеклянную колбу со стерильной пластмассовой крышкой. Никакие другие инструкции по сцеживанию, кроме тех, что предусмотрены в отделении, предоставлены не были.

Также были собраны данные о возрасте матерей, гестационном возрасте младенцев, стадии лактации (период после рождения ребенка и до момента сбора образца), количестве детей и предыдущем грудном вскармливании.

Подготовка образцов и гомогенизация

Для правильной гомогенизации каждый образец был первоначально подогрет до температуры 40°C в термостатической ванне. Температура контролировалась при помощи регистрирующего термометра с соответствующей измерительной шкалой.

После этого каждый образец был перемешан взбалтыванием десять раз, 12 аликвот по 2,5 мл были приготовлены и помещены в полипропиленовые пробирки.

В свою очередь, указанные 12 аликвот были распределены на 6 пар. Каждая пробирка была запечатана и промаркирована. Аликвоты были обозначены, исходя из периода замораживания – день 0 (или сырое молоко), день 7, день 15, день 30, день 60 и день 90, а также вида гомогенизации, которому они должны были подвергнуться (вручную или с помощью ультразвука). Все аликвоты, кроме обозначенных «день 0», были немедленно заморожены при температуре  –20°C.

Каждая аликвота из пары была гомогенизирована по-разному. Те, что были обозначены как «вручную», были разогреты до 40°C в термостатической ванне, после чего перемешаны взбалтыванием дважды. Для аликвот, обозначенных «с помощью ультразвука», применялся ультразвуковой процессор.. Аппарат предусматривает две различные настройки: PROC1 для гомогенизации образцов вручную и PROC2 с помощью ультразвука.

Параметры, применяемые в ультразвуковом процессоре следующие: амплитуда 75 %, скорость 1,5 мл в секунду. Эти параметры обеспечивают должную гомогенизацию образцов грудного молока (предварительно неопубликованные показатели - прим.ред.). Счетчик Коултера (анализатор размера частиц методом лазерной дифракции, исследовательский институт Beckman Coulter, Brea, CA)  использовался для измерения размера жировых шариков в грудном молоке. Его использовали для образцов, гомогенизированных вручную и гомогенизированных при помощи ультразвука с применением разных параметров ультразвукового процессора. Мы подтвердили, что при использовании вышеупомянутых параметров, размер шариков был стандартный: более 99% из них были менее 1 мкм.

Анализ образцов

Для анализа образцов использовался анализатор грудного молока. Оборудование требует 2 мл грудного молока и обеспечивает анализ жира, общего азота, лактозы, сухого вещества и энергетической ценности. Мы использовали настройку PROC1 для аликвот, обозначенных «вручную» (как для сырого молока, так и для размороженного) и настройку PROC2 для аликвот, обозначенных «при помощи ультразвука» (как для сырого молока, так и для размороженного).

По поводу технических данных: прибор обеспечил сходимость значений в 0.05%. В нашей лаборатории мы провели повторное исследование, в котором получили сходные результаты (количество образцов сырого молока – 10, количество образцов размороженного молока – 10, коэффициент внутригрупповой корреляции для жира и ккал = 0.99)

Анализатор грудного молока использует технологию, основанную на передаче среднего инфракрасного диапазона, специально разработанную для определения макронутриентов в грудном молоке. Тончайший слой грудного молока (менее 100 мкм) подвергается инфракрасному излучению. Для подсчета каждого макронутриента прибор использует спектр излучения, поглощаемого разными функциональными группами на определенных длинах волн, это предоставляет предварительную оценку относительно количества инфракрасного излучения, поглощаемого дистиллированной водой на тех же длинах волн.

Коэффициент жира, установленный прибором, соответствует общему количеству жирорастворимых частиц в образце грудного молока, включая триглицериды, диглицериды, свободные жирные кислоты, фосфолипиды и холестерин. Содержание общего азота включает белок и безбелковый азот. Это значение увеличено коэффициентом пересчета 6.25. Уровень лактозы соответствует показателю, состоящему из ее собственного содержания и олигосахаридов. Для расчета общей энергетической ценности мы использовали формулу общей энергии (Ккал/дл) = 9.25 х «жир» + 4.40 х «общий азот» + 3.95 х «лактоза».

Прибор был откалиброван производителем для оптимального исследования грудного молока с обычной биологической вариацией. Производитель использовал набор исходных образцов грудного молока с различным содержанием жира, белка и лактозы, которые были исследованы с помощью показательных биохимических методов: метод Розе-Готлиба (определение жира в молоке), метод Кьельдаля (определение общего азота), метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (для определения лактозы). Данные методы применялись отдельно для грудного молока гомогенизированного вручную и с помощью ультразвука. Использование раствора MIRIS CHECK (нейтральный раствор для поддержания точности измерений), предоставляемого производителем для нормальной эксплуатации прибора, позволяет избежать повторной калибровки. (Очень похоже на рекламу данного прибора, прямо продакт плейсмент в исследованиях - прим.ред.)

Анализ полученных данных

Описательная статистика представлена для четырех выходных параметров (жир, общий азот, лактоза и энергетическая ценность) и для двух методов гомогенизации (ручной и ультразвуковой). После того, как режимы распределения были проверены на соответствие стандартам, среднее значение и доверительный интервал (95%) представлены для каждого периода оценки (сырое молоко и 7й, 15й, 30й, 60й и 90й день). Статистическая значимость парных сравнений подсчитана с помощью парного t-теста.

Средняя разница в каждом периоде оценки с сырым грудным молоком (уровень доверия), с поправкой на способ гомогенизации и стадию лактации, была определена с помощью линейных смешанных регрессионных моделей. Средняя разница в день оценивалась для различных периодов исследования (с 1 по 7, с 8 по 15, с 15 по 30, с 30 по 60 и с 60 по 90 день). Анализ полученных данных для этой статьи был произведен с использованием программного обеспечения SAS (SAS Institute Inc., Cary, NC).

Результаты

Описание образца

Шестьдесят один образец грудного молока был получен от 59 матерей, выступивших в качестве доноров. Средний возраст матерей составил 32,55 года. Шестьдесят пять процентов матерей были из Испании, 18 % из Центральной и Южной Америки,  10% были из других европейских стран и 7% были из Африки. Пятьдесят восемь процентов матерей не имели предыдущего ребенка. Средний гестационный возраст их детей составил 32,66 недели. Сорок шесть процентов матерей (n=28) родили раньше 32й недели гестации,  21% (n=13) между 32й и 36й неделей и 33% (n=19)  - на 37й неделе или позже.

Что касается стадии лактации (в днях), процентильное распределение показывает минимальное значение – 5 дней и максимальное – 389 дней. 25-я, 50-я и 75-я процентильные величины показали 13, 18 и 41 день соответственно.

Питательные вещества и калорийность с учетом времени замораживания и вида гомогенизации

Таблица №1

Сравнение жира, общего азота, лактозы и калорийности в грудном молоке в различные периоды замораживания до 3-х месяцев с учетом двух видов гомогенизации.

 

 

 

 

Сырое молоко в сопоставлении с замороженным через определенный период времени

Состав, вид гомогенизации

Сырое молоко

7 дней

15 дней

30 дней

60 дней

90 дней

Жир (гр/дл)

ручной

4.88 (4.52, 5.23)

4.69 (4.34, 5.03)

4.54 (4.21, 4.88)

4.54 (4.19, 4.90)

4.37 (4.01, 4.72)

4.19 (3.84, 4.53)

P (вес)

p=0.048

p=0.001

p=0.001

p<0.001

p<0.001

ультразвуковой

5.23 (4.82, 5.64)

5.04 (4.66, 5.43)

5.08 (4.69, 5.47)

4.96 (4.57, 5.34)

4.87 (4.49, 5.24)

4.76 (4.39, 5.14)

P(вес)

p=0.002

p=0.001

p<0.001

p<0.001

p<0.001

Общий азот (гр/дл)

ручной

1.35 (1.28, 1.42)

1.36 (1.29, 1.43)

1.31 (1.24, 1.39)

1.31 (1.23, 1.39)

1.33 (1.26, 1.40)

1.30 (1.23, 1.38)

P (вес)

p=0.438

p=0.012

p=0.009

p=0.132

p=0.006

ультразвуковой

1.42 (1.34, 1.50)

1.44 (1.36, 1.52)

1.42 (1.35, 1.50)

1.40 (1.33, 1.48)

1.41 (1.34, 1.48)

1.42 (1.35, 1.49)

P (вес)

p=0.180

p=0.885

p=0.333

p=0.404

p=0.892

Лактоза (гр/дл)

ручной

5.94 (5.85, 6.03)

5.99 (5.91, 6.07)

6.03 (5.95, 6.10)

5.96 (5.88, 6.04)

5.98 (5.89, 6.06)

5.86 (5.76, 5.95)

P (вес)

p=0.043

p=0.001

p=0.291

p=0.359

p=0.016

ультразвуковой

6.09 (6.01, 6.17)

6.10 (6.03, 6.18)

6.11 (6.04, 6.18)

6.07 (5.99, 6.14)

6.06 (5.99, 6.13)

5.98 (5.90, 6.06)

P (вес)

p=0.487

p=0.281

p=0.175

p=0.180

p<0.001

Калорийность (ккал/дл)

ручной

75.33 (71.96, 78.70)

73.87 (70.60, 77.13)

72.54 (69.37, 75.71)

71.92 (68.56, 75.27)

70.45 (67.08, 73.82)

67.95 (64.56, 71.34)

P (вес)

p=0.101

p=0.002

p<0.001

p<0.001

p<0.001

ультразвуковой

78.69 (75.07, 82.33)

77.13 (73.72, 80.55)

77.46 (73.99, 80.93)

76.03 (72.52, 79.55)

75.23 (71.84, 78.62)

73.92 (70.55,77.29)

P (вес)

p=0.003

p=0.005

p<0.001

p<0.001

p<0.001

Все величины выражены средним значением (доверительный интервал среднего значения). Количество образцов n=61. Парный t-тест Стьюдента использовался для сравнения группы продолжительно замороженных образцов с группой образцов сырого молока.

Жир

В образцах, гомогенизированных вручную, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение в концентрации по сравнению с сырым грудным молоком на 7-й, 15-й, 30-й, 60-й и 90-й день после замораживания.

В образцах, гомогенизированных методом ультразвука, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение в концентрации по отношению к сырому грудному молоку на 7-й, 15-й, 30-й, 60-й и 90-й день после замораживания.

Общий азот

В образцах, гомогенизированных вручную, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение по отношению к концентрации в сыром молоке только на 15-й, 30-й и 90-й день после замораживания.

В образцах, гомогенизированных методом ультразвука, мы не наблюдали заметного с точки зрения статистики сокращения в любой период времени по сравнению с концентрацией в сыром грудном молоке.

Лактоза

В образцах, гомогенизированных вручную, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение по сравнению с концентрацией в сыром грудном молоке только на 90-й день после замораживания

В образцах, гомогенизированных методом ультразвука, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение по отношению к концентрации в сыром грудном молоке только на 90-й день после замораживания

Калорийность

В образцах, гомогенизированных вручную, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики сокращение в концентрации по сравнению с сырым грудным молоком на 15-й, 30-й, 60-й и 90-й день после замораживания.

В образцах, гомогенизированных с помощью ультразвука, мы наблюдали заметное с точки зрения статистики уменьшение в концентрации по сравнению с сырым молоком на 7-й, 15-й, 30-й, 60-й и 90-й день после заморозки.ш

Питательные вещества и калорийность с учетом времени замораживания, вида гомогенизации и стадии лактации

Таблица № 2.

 

 

 

 

Разница с сырым молоком в зависимости от периода замораживания

 

 

 

 

Состав

Контрольная группа

7 дней

15 дней

30 дней

60 дней

90 дней

Разница в     ультразвуковой и ручной гомогенизации

Стадия лактации менее 15 дней по сравнению со стадией лактации более 15 дней

Жир (гр/дл)

5.13 (4.68, 5.59)

–0.19 (–0.28, –0.09)

–0.24 (–0.34, –0.15)

–0.31 (–0.41, –0.22)

–0.42 (–0.51, –0.32)

–0.58 (–0.67, –0.48)

0.45 (0.39, 0.50)

–0.72 (–1.40, –0.05)

P (вес)

p=0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p=0.0348

Общий азот (гр/дл)

1.22 (1.14, 1.30)

0.01 (–0.01, 0.04)

–0.02 (–0.04, 0.01)

–0.03 (–0.05, –0.01)

–0.02 (–0.04, 0.01)

–0.02 (–0.05, 0.01)

0.09 (0.08, 0.1)

0.28 (0.16, 0.40)

P (вес)

p=0.2035

p=0.1202

p=0.0099

p=0.1158

p=0.0391

p<0.001

p<0.001

Лактоза (гр/дл)

5.89 (5.8, 5.98)

0.03 (–0.001, 0.07)

0.05 (0.02, 0,09)

0.01 (–0.03, 0.04)

–0.004 (–0.04, 0.03)

–0.09 (–0.12, –0.06)

0.11 (0.09, 0.13)

0.15 (0.01, 0.29)

P (вес)

p=0.0677

p=0.0017

p=0.9355

p=0.8616

p<0.0001

p<0.0001

p=0.0299

Калорийность (ккал/дл)

76.91 (72.66, 81.15)

–1.51 (–2.39, –0.63)

–2.01 (–2.89, –1.12)

–3.12 (–4.01, –2.23)

–3.99 (–4.89, –3.11)

–6.04 (–6.93, –5.15)

4.36 (3.84, 4.88)

–4.87 (–11.18, 1.42)

P (вес)

p=0.0009

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p<0.0001

p=0.1290

Данные усредненные (доверительный интервал среднего значения составляет 95%). Количество образцов n=61. Статистический анализ для значений p был составлен на основе смешанной модели регрессионного анализа. Значения контрольной группы определяются для образцов сырого молока, гомогенизированных вручную, на стадии лактации более 15 дней.

В качестве контрольной группы мы рассматривали образцы свежего молока, гомогенизированные вручную, стадия лактации более 15 дней.

Что касается времени замораживания, содержание жира со временем уменьшается. Учитывая среднюю разницу по дням, максимальное уменьшение наблюдалось в период от 0 до 7 дней (- 0,027 гр/дл/день). В следующих периодах среднее сокращение по дням уменьшилось: в период с 7-го по 15-й и с 15-го по 30-й день показатели были – 0,016 и – 0,011 гр/дл/день соответственно; для периодов с 30-го по 60-й и с 60-го по 90-й день показатели были – 0, 007 и – 0, 006 гр/дл/день соответственно.

В отношении общего азота и лактозы наблюдалась небольшая непостоянная и, в большинстве случаев, незначительная разница, учитывая абсолютные значения, а также среднюю разницу по дням.

Калорийность, так же как и содержание жира, уменьшалась со временем замораживания. Учитывая среднюю разницу по дням, наибольшее уменьшение наблюдалось в период с 0 по 7-й день (-0,22 ккал/дл/день), впоследствии уменьшение было постоянным, но небольшим в зависимости от времени. В периоды с 7-го по 15-й и с 15-го по 30-й день показатели были -0,06 и -0,07 ккал/дл/день соответственно, в периоды с 30-го по 60-й и с 60-го по 90-й день показатели были -0,03 и -0,07 ккал/дл/день соответственно.

Образцы, гомогенизированные с помощью ультразвукового процессора, показали более высокое содержание жира, общего азота, лактозы и калорийности, чем образцы гомогенизированные вручную.

Учитывая стадию лактации, у образцов, собранных на стадии более 15 дней, содержание жира было существенно выше, а показатели общего азота и лактозы были значительно ниже.

Таким образом, время замораживания, метод гомогенизации и стадия лактации самостоятельно изменили содержание жира. По поводу калорийности: время замораживания и метод гомогенизации самостоятельно ее изменили.

Комментарии

Принимая во внимание временные интервалы замораживания, наше исследование показало, что после 90 дней замораживания при температуре - 20°C, жир и энергетический состав грудного молока претерпевают клинически значимое с точки зрения статистики уменьшение абсолютного значения. В бивариантном анализе различия были статистически значимыми для всех периодов, и мы наблюдали совокупный максимум уменьшения через 90 дней. В мультивариантном анализе совокупное уменьшение также наблюдалось пропорционально времени замораживания.

С другой стороны, мы наблюдали максимум абсолютного взаимного снижения показателей жира и калорийности в период с 0 по 7-й день.

В свою очередь, содержание общего азота и лактозы показало меняющееся, слабое и непостоянное уменьшение пропорционально времени замораживания, что, соответственно, не является клинически значимым.

Принимая во внимание преобладающую долю жира в общей калорийности грудного молока и очень незначительное уменьшение содержания общего азота и лактозы в наших результатах, мы полагаем, что снижение калорийности главным образом определено уменьшением количества жира.

Это первое исследование, разработанное для оценки влияния замораживания при температуре –20°C в течение 90 дней на концентрацию макронутриентов и энергетическую ценность. Очень мало работ было опубликовано по этой тематике. Такен с соавторами исследовали 30 образцов, замороженных при температуре –18°C в течение 28 дней и не обнаружил никаких существенных различий в концентрации жира, используя калориметрический метод. Френд с соавторами исследовали в 20 образцах (10 подверглись медленной заморозке и 10 быстрой) методом Розе-Готлиба концентрацию жира по истечении одной недели, одного месяца и трех месяцев с момента замораживания при температуре –20°C. Это исследование выявило уменьшение концентрации, хотя оно не было статистически значимым. Сипралсерт с соавторами исследовали посредством CMT (creamatocrit, длина столба сливок, полученных центрифугированием молока, в процентах от общей длины столба молока - прим. перев.) 12 образцов, хранившихся при температуре –20°C в течение 28 дней, и не наблюдали никаких статистически достоверных изменений в содержании жира, данные по энергетическому содержанию не были опубликованы. Указанные исследования используют меньше образцов и меньший период заморозки, в образцах была исследована только концентрация общих триглицеридов.

Мы использовали анализатор грудного молока для исследования. Мы отказались от лабораторного метода (метод “золотого стандарта”), так как он является дорогостоящим и длительным. Прибор использует технологию ИК-спектрометрии, которая до этого широко использовалась в молочной промышленности. Две работы, опубликованные недавно, сравнили результаты, полученные с помощью анализатора, с теми, что были получены показательным лабораторным методом в отношении жира, белков, лактозы и энергетической ценности. В двух работах пришли к выводу, что это практический прибор для ежедневного измерения макронутриентов в грудном молоке в пределах клинической области исследования.

Две гипотезы могли обосновать уменьшение содержания жира при замораживании в соответствии с периодом хранения при температуре –20°C. Во-первых, некоторые указанные выше исследования показали, что при температуре –20°C сохраняется активность липазы, и по этой причине происходит активный липолиз, который разрушает триглицериды, уменьшая их содержание и увеличивая содержание диглицеридов, моноглицеридов и свободных жирных кислот. Однако, если мы учитываем, что два диапазона длин волн, используемых анализатором для липидов, измеряют одновременно триглицериды, диглицериды и свободные жирные кислоты, это не должно приводить к  существенному различию в количественных показателях жира.

C другой стороны, уменьшение антиокислительной активности в грудном молоке было обнаружено во время хранения как охлажденного молока при температуре ниже 5°C, так и замороженного при температуре –20°C. Следовательно, произошло перекисное окисление как свободных жирных кислот, так и тех, что связаны с глицеролом (три- и диглицериды), что привело к их физико-химическому видоизменению. Анализатор грудного молока не мог определить количество жирных кислот с измененной структурой. Нам понадобилось подтверждать нашу гипотезу с помощью исследований, разработанных для измерения перекисного окисления жирных кислот из грудного молока с разным периодом заморозки при температуре ниже –20°C, и их взаимосвязь с измерениями, полученными с помощью анализатора грудного молока.

При таких обстоятельствах существенное уменьшение содержания жира и энергетической ценности, наблюдаемое в период замораживания, могло быть обусловлено необнаруженными прибором липидами.

Наибольшее уменьшение жира и калорийности наблюдалось на 7й день. Это может быть связано с влиянием замораживания и размораживания. В недавно опубликованных исследованиях было установлено существенное уменьшение содержания жира после размораживания, как быстрого, так и медленного. Что касается действия замораживания и размораживания на качество и состав грудного молока: наблюдалось увеличение липолиза, но влияние на антиокислительные свойства не было изучено.

Одним из ограничений нашего исследования является то, что наши образцы имели различное время охлаждения (от 0 до 24 часов). Учитывая способность грудного молока к потере антиоксидантов при охлаждении, это могло стать потенциальным искажающим фактором, если наша предыдущая гипотеза, как описано ниже, верна.

Замораживание означает серию физико-химических изменений в компонентах грудного молока. Происходит разрыв в оболочке жирового шарика, за которым следует коалесценция (образование сливок). В отношении белков возникают процессы, которые приводят к выделению осадков (казеиновые мицеллы дестабилизированы, четвертичная структура сывороточных белков изменена). Для повторной гомогенизации грудного молока приведено обязательное требование: разогреть охлажденное грудное молоко и молоко, хранящееся при температуре –20°C, до температуры 38–40°C, после этого перемешать, осторожно переворачивая, чтобы часть жира не прилегала близко к поверхности. Тем не менее, данный прием не разрушает белковые связи и полностью не предотвращает образование сливок. Образцы, гомогенизированные ультразвуком, показали более высокое содержание макронутриентов по сравнению с теми образцами, что были гомогенизированы вручную. Это может быть объяснено наиболее благоприятной гомогенизацией. Правильная подготовка образцов грудного молока необходима для минимизации ошибок в измерении их компонентов.

В заключение, в модели с изменяющимися параметрами мы выявили, что образцы, полученные после 15 дней лактации, содержали больше жира и меньше общего азота и лактозы. Что касается калорийности: уменьшение наблюдалось, но было незначительным. Эти результаты совпадают с предыдущими исследованиями. Мы не зафиксировали уменьшения содержания жира при замораживании в образцах, содержащих молозиво (стадия лактации менее 15 дней). Охлаждение и быстрая заморозка могли ослабить противоокислительную способность молозива. Нет никаких опубликованных научных работ, которые исследуют изменение антиокислительной способности молозива и зрелого молока при охлаждении и замораживании по отдельности.

Наше исследование увеличивает сведения о влиянии замораживания при температуре –20°C (способ длительного хранения, используемый практически всеми неонатологическими отделениями и банками грудного молока) на питательные качества грудного молока. Два важных аспекта должны быть приняты во внимание: с одной стороны, статистически значимое падение при заморозке и размораживании и, с другой стороны, совокупное падение при длительном хранении. Последний аспект изложен с учетом других полезных свойств грудного молока, таких как антиокислительная способность или бактерицидная активность.

Важно установить правила для периодов хранения при температуре –20°C на основе научных доказательств, которые в достаточной степени обеспечат сохранение качества грудного молока,  даже за счет увеличивающихся потерь по причине истечения срока хранения. Насколько нам известно, нет никаких исследований о влиянии попадания в организм новорожденного липидных пероксидов, но предполагается, что даже внешний источник активных форм кислорода может быть опасен, особенно для недоношенных неокрепших младенцев с пониженной противоокислительной защитой организма.

Полученные результаты не применимы к пастеризованному грудному молоку, так как длительная пастеризация приводит к серии изменений в активности ферментов, присутствующих в грудном молоке.

Благодарность

Это исследование стало возможным, благодаря отзывчивости доноров грудного молока. Мы также благодарим Л. Фернандез (Мадридский университет Комплутенсе, факультет питания, броматологии и технологии пищевых продуктов) и SAMID (испанская сеть совместных исследований). Данное исследование финансировалось испанским фондом финансирования научных исследований в области здравоохранения (грант FIS 09/00040)

Заявление

Нет никаких конкурирующих между собой материальных интересов.

 

Авторы: Nadia Raquel García-Lara, Diana Escuder-Vieco, Oscar García-Algar, Javier De la Cruz, David Lora, and Carmen Pallás-Alonso

Перевод: Лилия Крутиченко для «Молочной мамы»

Под редакцией Соколовой Д.А.

Оригинал:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3411345/







livejournal


livejournal


livejournal


Мы в инстаграмме
Instagram


Комментарии

Добровольческое движение "Молочная мама" 2013-2017гг.

Все наши материалы можно и нужно использовать для пропаганды донорства грудного молока и грудного вскармливания в некоммерческих целях. Мы будем благодарны за указание источника.

Сайт соответствует кодексу ВОЗ маркетинга заменителей грудного молока.

Информация на сайте предоставлена для ознакомления, а не в качестве руководства к действию.

Сайт не является медицинской площадкой. Он создан для того, чтобы помочь родителям сделать осозннанный выбор в пользу донорского молока.

с 2015 года "Молочная мама" является IBFAN группой в России.

с 2015 года